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酵母培养物的制备方法如下:
1.准备培养基:选择适当的酵母培养基,如酵母氮碳基础培养基(YNB),酵母提取物培养基(YPD)等。按照培养基说明书中的配方,称取适量的培养基粉末。
2.制备培养基:将称取的培养基粉末加入蒸馏水中,搅拌均匀溶解,一般需要加热至85℃煮沸10-15分钟,然后冷却至室温。
3.调整pH值:使用pH计测量培养基的pH值,通常酵母培养物的pH值在5.0-6.0之间。根据需要,可以使用盐酸或氢氧化钠溶液进行pH值的调整。
4.加入碳源和氮源:根据培养基的配方,将适量的碳源和氮源加入培养基中。常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糖等,氮源包括氨基酸、尿素等。
5.灭菌:将制备好的培养基倒入适量的培养容器中,如琼脂培养皿或培养瓶等。使用高压蒸汽灭菌器或自动培养箱进行灭菌,一般需要在121℃高温下压力为1.05-1.1kg/cm2的条件下灭菌20-30分钟。
6.接种酵母菌株:将需要培养的酵母菌株接种到灭菌后的培养基中。可以使用无菌的吸管或酒精灯消毒过的注射器进行接种。
7.培养:将接种好的培养皿或培养瓶置于恒温摇床或恒温培养箱中,以适当的温度和适量的氧气供应条件下培养。培养时间根据具体需要而定,一般为16-48小时。
8.保存: 如果需要保存酵母培养物,可以使用无菌的离心管将培养物离心收集,去除培养基,并加入合适的保存液(如甘油、含蔗糖溶液等),然后存放在低温环境中,如-80℃冰箱中,避免冻融循环。